猪生殖与呼吸综合症病毒通用PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒依托病毒属通用保守基因序列设计引物，可广谱检测猪生殖与呼吸综合症病毒所有主流毒株，涵盖欧洲株、美洲株及变异毒株，无需分型即可完成快速初筛。试剂盒兼容性强、灵敏度优异，可检出微量病毒核酸，有效降低漏检率，适配多种猪临床样本。主要用于猪场蓝耳病大规模群体性筛查、未知毒株感染初诊、疫病快速排查，是猪场常态化疫病防控、批量样本检测的通用型核心试剂。

基础原理：

提取各类猪组织、体液样本病毒 RNA 并反转录，统一制备 cDNA 模板。

引物选择蓝耳病毒高度保守开放阅读框区域，可同时识别欧洲株、美洲株所有流行毒株。

仅做有无蓝耳病毒定性筛查，不区分毒株亚型，适用于猪场日常普检。

‌操作步骤‌：

样本制备：

使用CTAB法或商业DNA提取试剂盒从组织中提取基因组DNA。

建议DNA浓度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。

反应体系配制（20 μL体系示例）：

预混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）

特异性引物混合液

模板DNA（2~5 μL）

补充无核酸酶水至终体积。

PCR扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；

熔解曲线分析：60~95℃（可选，用于验证扩增特异性）。

结果判读：

阳性：Ct值≤35且熔解曲线峰单一；

阴性：Ct值≥40或无扩增曲线；

可疑：35<Ct值<40，建议复测或结合熔解曲线分析。

‌注意事项‌：

所有耗材必须无核酸酶，吸头一次性使用，禁止重复吸取；

阳性模板拷贝浓度高，开盖操作轻柔，避免气溶胶扩散造成全域污染；

试剂融化后冰上放置不超过 2 h，用完立即放回 - 20℃；

废弃 PCR 管、扩增产物、实验废液统一 121℃高压灭菌后丢弃；

试剂盒仅用于动植物、水产、微生物疫病科研检测，禁止人体临床检测；

移液器、操作台定期紫外消毒，长期污染需更换全新试剂盒全套试剂。

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