同山羊关节炎脑脊髓炎病毒梅迪维斯纳病病毒PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒可同时特异性检测山羊关节炎脑脊髓炎病毒与梅迪维斯纳病病毒两种反刍动物常见致病病毒，通过双重PCR技术实现一次样本检测、两种病毒同步甄别。试剂盒特异性优异，无交叉干扰，检测速度快、灵敏度高，能够精准检出潜伏感染及发病感染样本中的病毒核酸，主要用于山羊、绵羊养殖群体的疫病筛查、感染确诊、引种检疫及疫病流行监测，助力反刍动物慢性病毒性疫病的防控。

基础原理：

提取病畜外周血白细胞总 RNA，逆转录生成 cDNA，双组特异性引物分别靶向两种病毒基因组保守区同步扩增。

双荧光标记不同发光基团探针，两种病毒扩增产物分别激发不同波长荧光，实现单一管双重病原鉴别。

设置病毒 RNA 内参基因同步扩增，监控样本 RNA 降解、逆转录酶失活等实验失败因素。

‌操作步骤‌：

1. 样本处理

提取待测样本RNA，建议使用商品化RNA提取试剂盒。

2. 阳性对照稀释（示例：6个梯度）

标记离心管（7至2号），每管加入45μL模板稀释液。

按10倍梯度稀释阳性对照，避免交叉污染。

3. PCR反应体系配制（20μL/反应）

| 组分 | 体积（μL） |

| RT-PCR反应液 | 10 |

| 荧光染料 | 0.5 |

| 引物混合液 | 2 |

| RNA模板 | 2 |

| RNase-free水 | 补至20 |

4. 上机程序

逆转录：50℃ 15分钟（可选，根据病毒RNA特性调整）。

预变性：95℃ 2分钟。

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号），共40循环。

‌注意事项‌：

避免反复冻融试剂，解冻后需充分混匀。

实验环境需严格分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区），防止污染。

阳性对照需与样本分装操作。

本产品仅限科研用途，不可用于临床诊断。

操作时需穿戴防护装备，避免试剂接触皮肤或眼睛。

样本采集需遵循无菌原则，运输时使用干冰或冰袋保存。

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