人吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心ELISA技术原理，微孔板预先包被人IDO特异性抗体，加入标准品与待测组织、细胞上清样本，样本中的IDO抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除未结合杂蛋白，加入酶标记IDO检测抗体形成免疫复合物，充分洗涤后显色、终止反应，检测吸光度并结合标准曲线，定量测定样本中IDO的表达含量。
产品参数：

‌灵敏度：最小检出 0.06ng/mL

检测范围：0.2~12.8ng/mL

反应时间：样本孵育 75min，酶标抗体 45min，显色 15min，合计 135min

保存条件：2~8℃储存，底物液必须遮光存放

显色系统：避光稳定型 TMB 显色底物

检测波长：450nm 读数，630nm 扣除孔间本底

标准曲线绘制：八点梯度稀释，线性回归构建标准曲线

注意事项：炎症诱导 IDO 表达升高，需结合炎症指标联合判读结果
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

细胞上清 / 组织匀浆稀释：样本稀释液稀释上清混匀，室温静置 12min；试剂盒整套试剂室温平衡 32min。

微孔加样封板孵育：设置空白、标准、样本孔，加入对应液体与酶结合试剂，密封酶标板 37℃孵育 71min。

洗板除杂：洗涤液浸泡微孔 45s，洗板 5 次，彻底拍干微孔废液。

底物显色：加入显色 A、B 液避光混匀，37℃显色 18min。

终止液终止：准时加入终止液轻摇酶标板混匀。

光度检测：450nm 波长读取 OD 吸光度并归档。

蛋白定量：标准曲线带入样本 OD 值，换算稀释倍数得出 IDO 浓度。