人胰抑制素(Pancreastatin)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心ELISA技术原理，微孔板固定有抗人胰抑制素特异性抗体，作为固相捕获载体，加入梯度标准品和待测样本，样本中的胰抑制素抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除非特异性杂质，加入酶标记检测抗体形成免疫复合物，洗涤游离酶标抗体后进行底物显色，终止反应后检测吸光度，结合标准曲线精准定量样本中胰抑制素的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最小检出 9pg/mL

检测范围：35~2240pg/mL

反应时间：样本孵育 70min，二抗 40min，显色 15min，合计 125min

保存条件：2~8℃储存，浓缩洗涤液稀释比例严格按照说明书配比

显色系统：OPD 显色底物系统

检测波长：492nm 读数，600nm 扣除背景

标准曲线绘制：六点位标准品，直线回归构建校准曲线

注意事项：胃肠道消化液极易降解该多肽，样本采集后快速处理
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

血浆样本稀释：空腹血浆稀释配比混匀，室温静置 10min；试剂室温平衡 29min。

加样封板孵育：微孔加入标准品、待测血浆与酶标记液，密封酶标板 37℃孵育 64min。

洗板流程：洗涤液浸泡微孔 30s，洗板 5 次，拍干微孔内废液。

底物显色：加入显色 A、B 液避光混匀，37℃显色 15min。

终止反应：滴加终止液轻摇酶标板混匀。

酶标仪检测：450nm 读取各孔 OD 吸光度数据。

定量计算：标准曲线换算稀释倍数获得胰抑制素浓度。