人总蛋白S(TPS)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，预先将纯化的人总蛋白S（TPS）特异性抗体包被于酶标板微孔内，形成固相抗体。实验过程中，样本、标准品中的人总蛋白S会与固相抗体特异性结合，洗去未结合的杂质后，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成固相抗体-抗原-酶标抗体的免疫复合物。经过充分洗涤去除未结合酶标抗体后，加入底物TMB进行显色反应，在HRP催化下底物生成蓝色产物，终止液终止反应后转为黄色。最终通过酶标仪测定450nm波长下的吸光度值，吸光度值与样本中人总蛋白S的含量呈正相关，结合标准曲线即ᏸᏸ
基本参数‌：

产品名称：人总蛋白S(TPS)ELISA试剂盒

英文名称：TPS ELISA Kit
货号：Y-E2754

规格：48T/96T

灵敏度：最低可检出 0.15ng/mL 样本中总蛋白 S 含量

检测范围：0.3ng/mL～12ng/mL

反应时间：样本孵育 60min，酶结合物孵育 30min，底物显色 15min，终止后立即读数，总操作时长约 110min

保存条件：未拆封整套试剂盒 2～8℃避光储存；开封后板条密封 2～8℃可存 7 天，其余试剂 2～8℃1 个月，严禁冷冻

显色系统：TMB 单组分显色液，HRP 催化底物显色

检测波长：主波长 450nm，参比波长 630nm

标准曲线绘制：以标准品浓度为 X 轴，对应 OD 均值为 Y 轴，采用四参数 Logistic 拟合生成标准曲线

注意事项：血清样本需 3000rpm 离心 15min 去除絮状沉淀；洗板必须充分，避免非特异性结合造成背景偏高；底物液不可与氧化剂接触。
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 25min，配置洗涤液、TPS 标准品梯度稀释液，取出包被酶标板孔条。

每孔依次加入梯度标准品、待测样本、空白对照液，每孔加样量严格按照说明书定值，封板膜密封酶标板。

一步法直接加入酶结合工作液，混匀震荡 30s，37℃恒温避光孵育 60min。

揭掉封板膜，弃去孔内全部液体，每孔加满洗涤液浸泡 30s 后拍干，重复洗板 5 次。

每孔现配现加显色底物 A 液、B 液等量混合液，避光室温显色 15min。

快速加入终止液终止酶促显色反应，轻柔震荡酶标板混匀 10s。

酶标仪设置 450nm 主波长、630nm 参比波长读取各孔 OD 值，依据标准曲线计算样本 TPS 浓度。
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