人血小板相关免疫球蛋白(PAIg)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，微孔板预先包被抗人PAIg特异性抗体，加入待测血小板样本及标准品，样本中的PAIg与固相抗体特异性结合，洗涤去除未结合组分，加入酶标记检测抗体形成免疫复合物，洗涤纯化体系后进行底物显色，终止反应后测定吸光度，依据标准曲线线性关系，定量检测样本中PAIg的含量水平。
产品参数：

‌灵敏度：最小检出 0.1μg/10⁷血小板

检测范围：0.4~25.6μg/10⁷血小板

反应时间：样本孵育 75min，二抗 40min，显色 18min，合计 133min

保存条件：试剂盒 2~8℃，底物液单独避光存放

显色系统：单组分 TMB 显色，盐酸终止

检测波长：450nm 主波长，600nm 参比

标准曲线绘制：七点倍比稀释，四参数拟合标准曲线

注意事项：血小板计数需精准，否则最终浓度换算存在巨大误差
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

血小板处理上清稀释：样本上清用稀释液稀释混匀，室温静置 10min；试剂室温平衡 32min。

加样密封孵育：各微孔加入标准品、待测样本与酶结合工作液，覆膜封口，37℃孵育 62min。

洗板流程：洗涤液浸泡微孔 35s，洗板 5 次，倒扣拍干微孔内液体。

底物显色：加入显色 A、B 液避光混匀，37℃显色 15min。

终止显色反应：准时加入终止液轻摇混匀。

光度检测：450nm 波长测定 OD 值并逐条登记。

结果计算：绘制标准曲线换算稀释倍数，得到 PAIg 检测数值。