人轴突生长诱向因子4(Ntn4)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理，酶标板微孔预先固定人轴突生长诱向因子4特异性捕获抗体，加入梯度标准品和待测生物样本后，样本中的Ntn4抗原与固相抗体特异性结合，孵育洗涤后加入酶标记Ntn4检测抗体，形成完整的免疫三元复合物，经显色、终止反应后检测吸光度，依据标准曲线线性关系精准定量样本中Ntn4的表达量。
基本参数‌：

产品名称：人轴突生长诱向因子4(Ntn4)ELISA试剂盒

英文名称：Ntn4 ELISA Kit
货号：Y-E2571

规格：48T/96T

灵敏度：最低检出 0.08pg/mL

检测范围：0.16pg/mL - 10.24pg/mL

反应时间：抗原捕获 52min，酶结合 42min，显色 12min

保存条件：2～8℃冷藏，底物液不可室温长时间放置

显色系统：即用型 TMB 显色底物

检测波长：450nm 校正 630nm

标准曲线绘制：剔除异常孔后非线性建模绘制标准曲线

注意事项：神经组织样本离体后立即裂解，分泌型因子极易扩散降解
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 28min，梯度稀释 Ntn4 标准品，神经组织匀浆上清稀释预处理，对酶标板进行孔位编号标记。

逐孔更换枪头加样，空白孔加样本稀释液，标准品孔加梯度 Ntn4 标准品，样本孔加入待测匀浆样本。

直接向全部反应孔加入酶标记特异性抗体工作液，省略分步孵育洗板步骤，摇晃酶板混匀。

封板膜密封酶标板，37℃恒温避光孵育 68min，全程避光放置孵育箱内。

倒掉孔内废液，洗板液洗板 4 次，每次浸泡 32s，彻底拍干微孔内洗涤残留。

避光加入显色底物混合液，37℃避光显色 16min，梯度显色分明即可终止。

终止液终止反应，酶标仪 450nm 读取 OD 值，绘制标准曲线换算 Ntn4 含量。
公司正在出售的产品：