人血清素/血清胺(ST)ELISA试剂盒

本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附检测原理，微孔板预先包被人ST抗原，实验时将待测样本、标准品与酶标记ST抗体同步加入微孔，样本中的ST抗原与包被固相抗原竞争性结合有限的酶标记抗体，孵育平衡后洗涤去除未结合组分，加入显色底物进行显色反应，样本中ST含量越高，结合至固相的酶标抗体越少，显色越浅，终止反应后检测吸光度，依据标准曲线反向定量计算样本中ST的含量。
产品参数：

‌灵敏度：检出限 0.04ng/mL

检测范围：0.1~6.4ng/mL

反应时间：37℃孵育 90min，二抗 50min，避光显色 13min，总 153min

保存条件：试剂盒 2~8℃，底物液必须避光存放，见光易氧化失效

显色系统：TMB 避光显色体系

检测波长：450nm 读取 OD 值

标准曲线绘制：六点标准品浓度，线性拟合标准曲线

注意事项：样本避免光照分解血清素，采血后尽快分离血清
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

样本预处理：血浆 / 血清样本稀释液稀释，混匀后室温静置 10min；试剂室温平衡 35min。

一步共加样孵育：微孔加入标准品、待测样本及酶标记液，密封酶标板，37℃孵育 65min。

多次洗板：洗涤液浸泡微孔 40s，洗板 5 次，彻底拍干残留液体。

避光显色：加入显色双液，混匀避光 37℃显色 16min。

终止反应：添加终止液终止显色，轻微振荡混匀。

检测吸光度：450nm 波长检测每孔 OD 值并记录。

浓度计算：标准曲线法换算稀释倍数，得到样本血清素 ST 含量。