人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔固定人肿瘤坏死因子α转化酶特异性抗体，加入梯度标准品和待测样本后，样本中的TACE抗原与固相抗体特异性结合，孵育洗涤后加入酶标记TACE检测抗体，形成完整的免疫复合物，经显色反应后检测OD值，结合标准曲线线性关系，精准定量样本中TACE蛋白的表达水平。
基本参数‌：

产品名称：人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)ELISA试剂盒

英文名称：TACE Elisa Kit
货号：Y-E3034

规格：48T/96T

灵敏度：最小检测 0.19pg/mL

检测范围：0.38pg/mL - 24.32pg/mL

反应时间：孵育 54min、44min，避光显色 14min

保存条件：2～8℃冷藏，开封后板条密封加干燥剂

显色系统：HRP 介导 TMB 双液显色

检测波长：450nm

标准曲线绘制：去除背景本底后非线性拟合标准曲线

注意事项：细胞裂解液需加入蛋白酶抑制剂，防止 TACE 蛋白被降解
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：

试剂室温平衡 28min，倍比稀释 TACE 标准品，组织匀浆上清稀释预处理，标记酶标板微孔类别。

向空白、标准、样本孔分别加入稀释液、梯度标准品、待测匀浆样本，防止加样交叉污染。

一步法直接添加酶联特异性抗体工作液至所有反应孔，手动摇晃混匀体系。

封板密封，37℃湿盒避光孵育 63min，保证孵育环境湿度充足。

去除封板倾倒液体，洗板液浸泡每孔 29s，重复洗板 4 次并拍干微孔。

避光加入显色 AB 底物液，室温避光显色 17min，把控显色时长避免过深。

终止液终止显色，450nm 读取吸光值，绘制标准曲线计算 TACE 浓度。
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