人中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，酶标板微孔预先包被抗人中性粒细胞碱性磷酸酶特异性捕获抗体，加入标准品及待测样本后，样本中的NAP与固相抗体特异性结合，洗涤去除游离杂质，加入HRP标记的NAP检测抗体形成免疫夹心复合物，底物显色后终止反应，吸光度值与NAP含量成正比，通过标准曲线可定量检测样本中目标酶的浓度。
基本参数‌：

产品名称：人中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)ELISA试剂盒

英文名称：NAP Elisa Kit
货号：Y-E3056

规格：48T/96T

灵敏度：检出下限 0.2U/L

检测范围：0.4U/L - 25.6U/L

反应时间：抗原结合 46min，酶二抗 46min，显色 13min

保存条件：试剂盒 2-8℃避光，底物液不可室温久放

显色系统：TMB 显色体系

检测波长：450nm 校正 630nm

标准曲线绘制：四参数拟合标准曲线，适配酶活性定量检测

注意事项：抗凝血液样本优先选用 EDTA 抗凝，肝素会抑制酶活性造成结果偏差
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果
实验步骤如下：

试剂盒室温回温 30min，梯度稀释 NAP 标准品，白细胞裂解液稀释制备待测样本，对酶标板分组标记。

空白孔加稀释缓冲液，标准品孔依次添加梯度 NAP 标准液，样本孔加入待测裂解样本。

直接向全部微孔加入酶标记抗体工作液，省略分步孵育洗板，轻板混匀液体。

封板膜密封酶标板，37℃恒温避光孵育 66min，单层放置孵育。

倒掉孔内反应废液，洗板液洗板 5 次，每次浸泡 32s，拍干微孔残留洗液。

避光滴加显色底物，37℃避光显色 15min，观察梯度显色效果。

终止液终止反应，酶标仪 450nm 测 OD 值，换算 NAP 酶蛋白浓度。
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