人血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，微孔板预先固定抗人VE-cad特异性抗体，加入标准品与待测样本后，样本中的VE-cad抗原与固相抗体特异性结合，孵育完成免疫结合反应后洗涤除杂，加入HRP标记的VE-cad配对检测抗体，形成稳定的三元免疫复合物，底物显色终止后检测吸光度，结合标准曲线测算样本中VE-cad的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：0.06ng/mL

检测范围：0.1-6.4ng/mL

反应时间：室温孵育 94min，二抗 62min，避光显色 16min

保存条件：2～8℃避光，标准品冻干品复溶后一次性使用

显色系统：高灵敏度底物显色，适合内皮细胞上清低浓度检测

检测波长：450nm，600nm 参比波长

标准曲线绘制：线性回归构建标准方程换算 VE-cad 复合体浓度

注意事项：细胞上清样本不可剧烈震荡，VE-cad 复合体易解聚导致检测数值偏低
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 26min，稀释一步法酶标抗体液，标记微孔板各组实验孔。

各孔预加酶结合液 50μL，标准孔加梯度 VE-cad 标准液 50μL，待测孔加内皮细胞裂解液 50μL，空白孔加缓冲液。

封板 37℃孵育 69min，弃净孔内液体，洗板 5 次，每次浸泡 31s，彻底拍干微孔板。

依次添加显色 A 液、B 液各 50μL，轻微震荡混匀。

避光 37℃显色 17min。

加入终止液 50μL 终止显色反应。

450nm 测 OD 值，计算 VE-cad 复合体含量。