人中性粒细胞防御素1-3(HNP1-3)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心ELISA技术原理，酶标板微孔包被纯化的人中性粒细胞防御素1-3特异性抗体，待测样本与梯度标准品中的HNP1-3抗原可与固相抗体特异性结合，孵育洗涤后加入酶标记检测抗体构建免疫复合物，经显色、终止反应后检测吸光度，根据数值与抗原浓度的正相关关系，精准定量样本中HNP1-3的含量。
基本参数‌：

产品名称：人中性粒细胞防御素1-3(HNP1-3)ELISA试剂盒

英文名称：HNP1-3 ELISA Kit
货号：Y-E2756

规格：48T/96T

灵敏度：最低检出 0.17μg/L

检测范围：0.34μg/L - 21.76μg/L

反应时间：总操作 112min，孵育 52min、40min，显色 20min

保存条件：整套试剂 2～8℃，洗涤液浓缩液室温无结晶正常使用

显色系统：OPD 底物显色，硫酸终止

检测波长：492nm

标准曲线绘制：双孔重复测定标准品，取 OD 平均值构建标准曲线

注意事项：外周血样本避免凝血过度，中性粒细胞破裂释放内源物干扰数值
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：

试剂盒室温放置 33min，稀释配制 HNP1-3 标准品系列梯度，中性粒细胞裂解上清稀释待测，标注酶标板孔位。

规范加样，空白孔加稀释液，标准孔加梯度标准品，样本孔加入裂解待测样本，枪头逐孔更换。

一步法直接加入酶结合抗体工作液至所有微孔，震荡混匀 12s。

封板封口，37℃避光孵育 70min，全程避光保存酶标板。

弃除孔内废液，洗板液浸泡每孔 30s，连续洗板 5 次并彻底拍干。

避光加入显色底物混合液，室温避光显色 18min，依据颜色梯度终止反应。

终止液终止显色，450nm 波长读数，计算 HNP1-3 防御素含量。
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