人中期因子(MK)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理，固相酶标板微孔固定人中期因子特异性抗体，加入标准品和待测生物样本后，样本中的MK抗原与固相抗体特异性免疫结合，洗板去除未结合物质，加入HRP标记的MK检测抗体形成夹心复合物，底物显色深浅与MK含量呈正相关，终止反应后检测OD值，结合标准曲线完成样本中中期因子的定量检测。
基本参数‌：

产品名称：人中期因子(MK)ELISA试剂盒

英文名称：MK   Elisa Kit
货号：Y-E298

规格：48T/96T

灵敏度：检测限 0.13ng/mL

检测范围：0.26ng/mL - 16.64ng/mL

反应时间：一抗温育 36min，二抗 36min，避光显色 14min

保存条件：2-8℃冷藏，标准品分装冻存可延长使用周期

显色系统：稳定型单组份 TMB 底物

检测波长：450nm 单波长读数

标准曲线绘制：剔除极值孔后以线性法绘制标准曲线

注意事项：肿瘤组织样本避免反复冻融超过 2 次，蛋白降解会导致结果偏低
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 30min，梯度稀释 MK 标准品，血清 / 细胞上清样本稀释预处理，标记酶标板各微孔用途。

空白孔添加样本稀释缓冲液，标准品孔加入梯度 MK 标准溶液，样本孔加入待测样本。

直接向全部反应孔加入酶标记抗体工作液，轻摇酶标板混匀孔内液体。

封板密封后置于 37℃湿盒避光孵育 60min，维持稳定孵育温度。

撕开封板倾倒废液，洗板液洗板 4 次，每次浸泡 35s，吸水纸拍干微孔。

避光加入 TMB 显色液，37℃避光显色 14min，显色梯度分明即可终止。

加入终止液终止反应，酶标仪 450nm 检测 OD 值，计算样本 MK 中期因子浓度。
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