人脂多糖/内毒素(LPS)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附原理，将抗人脂多糖特异性抗体包被于酶标板微孔作为固相载体，加入不同浓度标准品和待测样本后，样本中的LPS与固相抗体特异性结合，孵育洗涤后加入HRP标记的LPS检测抗体，构建免疫夹心复合物，经显色反应后，依据OD值与LPS浓度的线性关系，结合标准曲线定量检测样本中内毒素的含量。
基本参数‌：

产品名称：人脂多糖/内毒素(LPS)ELISA试剂盒

英文名称：LPS  Elisa Kit
货号：Y-E785

规格：48T/96T

灵敏度：检出下限 0.03EU/mL

检测范围：0.06EU/mL - 3.84EU/mL

反应时间：室温结合 52min，酶孵育 42min，显色 14min

保存条件：试剂盒 2-8℃，避免环境热源导致内毒素试剂降解

显色系统：单组份 TMB 稳定显色底物

检测波长：450nm 参比 650nm

标准曲线绘制：四参数拟合标准曲线，严格设置阴性空白对照

注意事项：所有耗材必须无热原，枪头、离心管需去内毒素处理
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒无热源环境室温平衡 35min，无热源稀释 LPS 标准品，血清样本无热源预处理稀释，标记酶标板微孔。

无热源枪头加样，空白孔加无热源稀释液，标准孔加梯度 LPS 标准品，样本孔加待测血清。

一步法直接添加无热源酶标记抗体工作液，轻晃酶板混匀，全程避免外源内毒素污染。

无热源封板密封，37℃避光孵育 65min，孵育箱提前除热源。

废液弃去，无热源洗板液洗板 6 次，每次浸泡 30s，拍干微孔残留洗液。

避光无热源环境添加显色底物，室温显色 16min，严格把控显色时长。

终止液终止反应，450nm 读取 OD 值，计算样本内毒素 LPS 浓度。
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