人整合素连接激酶1(ILK-1)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心免疫酶标原理，预先在酶标板微孔包被抗人ILK-1特异性抗体，加入待测样本与梯度标准品，样本中的整合素连接激酶1与固相捕获抗体特异性结合，孵育洗涤后加入HRP标记的ILK-1检测抗体，形成稳定的三元免疫复合物，经显色、终止反应后检测OD值，结合标准曲线精准定量样本中ILK-1蛋白的表达量。
基本参数‌：

产品名称：人整合素连接激酶1(ILK-1)ELISA试剂盒

英文名称：ILK-1  Elisa Kit
货号：Y-E948

规格：48T/96T

灵敏度：检测限 0.11pg/mL

检测范围：0.22pg/mL - 14pg/mL

反应时间：总流程 108min，一抗 48min，二抗 40min，显色 20min

保存条件：未拆分试剂盒 2-8℃避光保存

显色系统：HRP 催化 TMB 底物显色

检测波长：450nm 读取吸光度

标准曲线绘制：剔除离散异常孔后以四参数法绘制标准曲线

注意事项：组织匀浆样本必须充分离心去除组织残渣再上样
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒室温放置 32min，配制 ILK-1 标准品梯度稀释液，组织细胞裂解上清稀释待测，标注酶标板微孔组别。

分别向对应孔加入稀释空白液、梯度标准品、待测裂解样本，杜绝样本交叉污染。

直接向全部微孔加入酶标抗体工作液，省略分步孵育，轻摇酶板混匀体系。

封板密封后 37℃湿盒避光孵育 66min，维持孵育湿度。

去除封板倾倒液体，洗板液浸泡每孔 29s，重复洗板 5 次并拍干。

避光加入显色底物，室温避光显色 17min，观察标准品颜色梯度。

终止液终止反应，酶标仪 450nm 读数，计算 ILK-1 激酶蛋白浓度。
公司正在出售的产品：