人再生基因蛋白IV(REG-4)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心免疫酶标原理，预先在酶标板微孔包被纯化的人再生基因蛋白IV特异性抗体，加入标准品和待测样本后，样本中的REG-4抗原与固相抗体特异性结合，洗板去除未结合成分，随后加入HRP标记的REG-4检测抗体，形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合物，显色反应后OD值与REG-4含量正相关，通过标准曲线即可定量检测样本中REG-4蛋白浓度。
基本参数‌：

产品名称：人再生基因蛋白IV(REG-4)ELISA试剂盒

英文名称：REG-4 ELISA Kit
货号：Y-E2574

规格：48T/96T

灵敏度：检测限 0.1ng/mL

检测范围：0.2ng/mL - 12.5ng/mL

反应时间：抗原捕获 40min，二抗结合 40min，显色 14min

保存条件：2-8℃避光保存，板条剩余部分连同干燥剂密封冷藏

显色系统：即用型 TMB 显色液，无需配比

检测波长：450nm 为主波长，650nm 参考

标准曲线绘制：设置空白对照孔，扣除本底后绘制标准曲线

注意事项：粪便提取样本需充分过滤杂质，防止微孔板堵孔
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：

试剂盒室温回温 30min，梯度稀释 REG-4 标准品，细胞培养上清样本稀释，标注酶标板标准孔、样本孔、空白孔。

按规定体积加样，空白孔加稀释缓冲液，标准孔加不同浓度 REG-4 标准液，样本孔加入待测上清。

直接向全部微孔加入酶标抗体工作液，无需前置孵育洗板，轻板混匀液体。

封板密封后置于 37℃恒温箱避光孵育 65min，板体平放无挤压。

撕掉封板倒掉液体，洗板液加满微孔浸泡 30s，连续洗板 5 次并拍干。

避光加入显色底物，室温避光显色 16min，根据标准品显色梯度判断终止节点。

终止液终止显色，酶标仪 450nm 测 OD 值，换算得到样本 REG-4 蛋白浓度。
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