人衔接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，微孔板包被纯化的抗人APAF1特异性抗体，能够特异性结合标准品及待测样本中的APAF1抗原，孵育充分反应后洗涤去除孔内游离杂质，加入HRP标记的APAF1二抗形成免疫夹心复合物，底物催化显色后用终止液终止反应，酶标仪检测各孔OD值，根据标准曲线计算出待测样本中APAF1的精准浓度。
产品参数：

‌灵敏度：0.06ng/mL

检测范围：0.1-6.4ng/mL

反应时间：37℃孵育 68min，酶标抗体 42min，显色 9min

保存条件：未开启 2-8℃长期保存；浓缩试剂稀释后 4℃可存 7 天

显色系统：即用型单一显色液，操作步骤简化

检测波长：450nm 直接读数

标准曲线绘制：半对数坐标构建标准曲线，计算样本原始浓度

注意事项：凋亡样本中 APAF1 易降解，取样后立即置于冰上裂解处理
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 35min，配制一步法抗原 - 酶混合液，标记实验孔类型。

每孔先加注酶复合液 60μL，标品孔加梯度 APAF1 标准品 40μL，样品孔加预处理样本 40μL，空白孔加稀释液 40μL。

封板 37℃孵育 59min，倾倒废液，洗板 4 次，每次浸泡 27s，拍干微孔板。

每孔加入 TMB 显色底物 100μL，水平摇晃混匀。

室温避光显色 12min。

快速加入终止液 50μL 终止显色。

450nm 读取吸光值，标准曲线换算 APAF1 含量。