人纤维蛋白(Fibrin)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法测定样本中人纤维蛋白含量，微孔板孔壁包被有高特异性抗人纤维蛋白抗体，加入标准品与待测样本后，样本中的纤维蛋白抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除非结合组分后，加入辣根过氧化物酶标记的二抗完成夹心结合，经底物显色、终止反应后检测OD值，根据OD值与纤维蛋白含量的正相关关系，通过标准曲线计算样本中纤维蛋白的含量。
产品参数：

‌灵敏度：0.3μg/mL

检测范围：0.6-38.4μg/mL

反应时间：封闭 25min，样本孵育 95min，二抗 58min，显色 20min

保存条件：整套试剂 2～8℃避光储存，洗涤液结晶 37℃水浴融化即可

显色系统：HRP 催化 TMB 显色，2M 硫酸终止

检测波长：450nm 为主波长读数

标准曲线绘制：标准品梯度稀释做线性回归，R²≥0.98 方可使用

注意事项：样本不可发生凝固，凝固后纤维蛋白交联无法被试剂盒识别，结果严重失真
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

试剂盒常温放置 32min 复温，配置一步法酶复合物工作液，排布实验孔。

每孔先加酶混合液 60μL，标准品孔加梯度 Fibrin 标准液 40μL，样品孔加待测样本 40μL，空白孔加稀释液 40μL。

封板 37℃孵育 56min，甩净液体，洗板 4 次，每次浸泡 26s，吸水纸拍干。

每孔加入 TMB 显色底物 100μL，摇晃混匀。

室温避光显色 11min。

加入终止液 50μL 终止显色。

450nm 测 OD 值，标准曲线计算纤维蛋白含量。