大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心ELISA检测原理，将高特异性的大鼠AGEs单克隆抗体固定于酶标板微孔表面。待测样本、梯度标准品中的AGEs抗原可与固相抗体特异性结合，孵育洗板后加入辣根过氧化物酶标记的抗AGEs抗体，形成稳定的夹心免疫复合物。再次洗涤去除未结合组分，加入TMB底物显色，酶促反应生成的蓝色产物深浅与样本中AGEs浓度成正比，经终止液终止反应后，测定吸光度，拟合标准曲线即可计算样本中大鼠AGEs的含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤0.3μg/mL

检测范围：0.5μg/mL - 20μg/mL

反应时间：全程105分钟，样本孵育45分钟，酶孵育30分钟，显色20分钟

保存条件：试剂盒主体试剂2-8℃保存，标准品-20℃冷冻分装保存，避免反复冻融

有效期：整体有效期8个月，分装标准品冻存后可保存3个月

特异性：精准识别大鼠AGEs复合物，与早期糖基化产物、糖化蛋白交叉反应率＜3%

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%，满足科研实验检测标准

注意事项：血清样本需新鲜制备，避免样本氧化降解；冻存样本解冻后需颠倒混匀，禁止剧烈震荡；实验温度需控制在22-28℃恒温环境。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

公司正在出售的产品：

实验操作流程：

微孔板拆封后室温平衡，标准品系列稀释，待测血清 / 组织上清稀释处理，空白孔加稀释液，样本孔与标准孔每孔加样 50μL。

直接加入 AGEs 酶标记抗体工作液 50μL，封板膜封严，37℃孵育 70min。

弃液洗板，每孔加满洗液浸泡 40s，甩干重复 6 次，吸水纸用力拍干板条。

先后加入显色 A、B 液各 50μL，震荡混匀，37℃避光显色 20min。

每孔加注终止液 50μL，终止催化反应。

酶标仪 450nm 波长测定每孔 OD 值，记录读数。

依托标准曲线计算样品 AGEs 浓度，乘以稀释倍数得到原始样本浓度。