大鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉(DPD)ELISA试剂盒

本试剂盒基于竞争性酶联免疫吸附反应原理，酶标板预先包被DPD抗原。检测过程中，样本与标准品中的DPD抗原会与板上固相抗原竞争结合特异性抗体，随后加入酶标记二抗结合已结合的一抗，通过洗涤去除未结合的游离物质。加入显色底物后发生酶促显色反应，样本中DPD含量越高，竞争结合的抗体越多，最终显色越浅，吸光度值越低，依据标准曲线的浓度与吸光度对应关系，即可定量检测大鼠样本中DPD的含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤0.05nmol/L

检测范围：0.1nmol/L - 10nmol/L

反应时间：总反应时长120分钟，样本孵育60分钟，酶结合物孵育30分钟，显色15分钟

保存条件：全部试剂2-8℃密封冷藏，显色液、终止液单独避光存放

有效期：原装未开封有效期12个月，开盖后试剂4℃保存，20天内使用完毕

特异性：特异性结合大鼠DPD，与吡啶酚、骨代谢同类标志物无明显交叉反应，种属特异性极强

重复性：板内CV≤5%，板间CV≤7%，批间差异小，检测结果稳定

注意事项：尿液样本需提前稀释预处理，避免杂质干扰；显色时间需严格把控，超时显色会导致数值偏高；实验所用耗材需无酶无污染，避免酶活性失效。
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

取出微孔板室温放置 25min 回温，标准品用稀释液梯度稀释配制 6 个浓度梯度，样本按说明书比例稀释，空白孔仅加稀释液，每孔上样 40μL。

每孔直接加入 DPD 酶结合物 60μL，封板封口，置于 37℃水浴箱避光孵育 45min。

手动洗板，每孔注满洗涤液浸泡 25s，倒扣拍干，连续洗板 4 次，彻底去除未结合游离组分。

每孔添加显色底物混合液 100μL，避光室温条件下显色 12min，期间避免强光直射。

每孔加入终止液 50μL，充分混匀终止显色，防止底物过度反应造成数据偏差。

酶标仪调至 450nm 主波长、630nm 参比波长检测各孔吸光值。

拟合标准曲线方程，换算稀释倍数，计算大鼠样本内 DPD 含量。