大鼠透明质酸结合蛋白(HABP)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附技术检测大鼠HABP含量。固相酶标板包被纯化的大鼠HABP特异性抗体，加入待测样本与标准品后，样本中的透明质酸结合蛋白与固相抗体特异性结合，洗板去除未结合杂蛋白，加入HRP标记的HABP检测抗体形成免疫夹心复合物，底物显色后检测吸光度，对照标准曲线可精准定量大鼠HABP的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度0.2ng/mL，精准检测大鼠组织、血清中HABP微量蛋白。

检测范围：0.4ng/mL - 22ng/mL，覆盖大鼠组织重塑、纤维化模型检测区间。

反应时间：标准时长95分钟，孵育65分钟，显色30分钟。

保存条件：蛋白抗体试剂2-8℃避光冷藏，严禁冻融，防潮保存。

有效期：原装有效期7个月，稀释试剂仅限当日实验使用。

特异性：特异性识别大鼠透明质酸结合蛋白，无同源结合蛋白交叉反应。

重复性：板内CV≤5.8%，板间CV≤7.3%，实验重复性优异。

注意事项：样本需去除多糖杂质，避免干扰蛋白结合反应，孵育环境无粉尘污染。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 29min，稀释洗涤工作液，倍比稀释 HABP 标准品，取出实验所需板条，剩余板条密封低温避光存放。

区分空白孔、标准品孔、待测样本孔；标准品孔加标准液 50μL，样本孔加入稀释待测样本 50μL，空白孔空置。

标准品与样本孔加入酶结合物 100μL，封板后 37℃孵育 67min。

弃净液体，洗涤液注满每孔浸泡 30s，拍干，重复洗板 5 次。

依次添加显色液 A、B 各 50μL，轻柔混匀，37℃避光显色 15min。

加入终止液 50μL 混匀终止显色体系。

450nm 读取吸光值，对照标准曲线换算 HABP 样本含量。