大鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒

本试剂盒采用间接法酶联免疫吸附原理，将纯化的幽门螺旋菌特异性抗原包被于酶标板微孔，封闭非特异性位点后加入大鼠待测血清样本，样本中的Hp-IgG抗体可与固相抗原特异性结合，洗涤去除未结合杂质，加入酶标记抗大鼠IgG二抗孵育结合，再次洗涤后加入底物显色，显色强度与样本中幽门螺旋菌IgG抗体含量呈正相关，通过吸光度检测及标准曲线比对完成定量检测。
基本参数‌：

产品名称：大鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒

英文名称：Hp-IgG ELISA Kit
货号：Y-E1152

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测滴度1:10

检测范围：1:10 - 1:640

反应时间：全程190分钟（样本孵育130min，酶标孵育30min，显色30min）

保存条件：2-8℃密封保存，酶结合液避光存放

有效期：未开封储存有效期12个月

特异性：特异性识别大鼠幽门螺旋菌特异性IgG，与其他肠道菌抗体无交叉反应

重复性：板内变异系数CV≤7%，板间变异系数CV≤10%

注意事项：血清样本无污染、无溶血；孵育全程保湿避光；显色终止后10分钟内完成读数
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒常温静置 30min，配比洗涤缓冲液，梯度稀释 Hp-IgG 标准品，酶标板标记孔位组别。

标准品孔加入梯度幽门螺旋菌 IgG 标准品 50μL，样本孔加入 50μL 大鼠血清待测液，空白孔空置不加液。

非空白孔加入一步法酶标记二抗工作液 100μL，封板密封，37℃孵育 55min。

揭膜倾倒废液，洗涤液加满微孔浸泡 35s 后甩干，连续洗板 5 次，吸干残留液体。

每孔加入显色液 A、B 各 50μL，避光 37℃显色 16min。

逐孔添加终止液 50μL 终止反应，轻摇酶标板混匀。

450nm 波长读取吸光值，依据标准曲线计算 Hp-IgG 抗体含量。
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