大鼠抑制素结合蛋白(INHBP)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心ELISA检测原理，将纯化的大鼠INHBP特异性抗体包被于酶标板微孔，作为固相捕获载体，加入标准品与大鼠待测样本后，样本中的抑制素结合蛋白与固相抗体特异性结合，洗涤去除游离成分，再加入酶标记的INHBP检测抗体形成免疫复合物，经底物显色反应后，依据吸光度值和标准曲线，可精准定量大鼠样本中INHBP的浓度。
基本参数‌：

产品名称：大鼠抑制素结合蛋白(INHBP)ELISA试剂盒

英文名称：INHBP ELISA Kit
货号：Y-E1077

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度0.09ng/mL

检测范围：0.2ng/mL - 8ng/mL

反应时间：全程150分钟（样本孵育90min，酶标孵育30min，显色30min）

保存条件：2-8℃冷藏避光，所有试剂避免室温长时间放置

有效期：未开封储存有效期8个月

特异性：特异性结合大鼠INHBP，不与抑制素、激活素及其他结合蛋白交叉反应

重复性：板内变异系数CV≤5%，板间变异系数CV≤8%

注意事项：组织匀浆样本需去除脂质杂质；试剂平衡室温后再使用；空白对照、阴性对照必须同步设置
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 30min，稀释浓缩洗涤液，配制 INHBP 梯度标准液，标记酶标板各组微孔。

标准孔加入梯度 INHBP 标准品 50μL，待测孔加入 50μL 大鼠血浆样本，空白孔无液体添加。

全部检测孔加入一步法酶偶联抗原工作液 100μL，覆膜封板，37℃孵育 60min。

弃液洗板，洗涤液浸润微孔 40s 后甩干，重复洗板 5 次，拍净多余洗涤液。

每孔加入显色 A 液、B 液各 50μL，避光 37℃显色 15min。

加入终止液 50μL 终止显色反应，水平震荡混匀。

酶标仪 450nm 测定 OD 值，定量样本抑制素结合蛋白 INHBP 水平。
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