大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA试剂盒

本试剂盒采用同工酶特异性双抗体夹心ELISA技术检测大鼠GP-BB含量。酶标板孔内包被针对大鼠GP-BB的特异性单克隆抗体，可特异性捕获样本中的GP-BB抗原，有效区分其他糖原磷酸化酶同工酶，经洗板除杂后，加入酶标记的GP-BB检测抗体形成免疫复合物，底物显色后检测吸光度，对照标准曲线精准定量大鼠GP-BB的表达浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度0.2ng/mL，精准检测大鼠脑、神经组织中GP-BB同工酶含量。

检测范围：0.4ng/mL - 13ng/mL，适配大鼠脑损伤、神经代谢模型样本检测。

反应时间：标准时长95分钟，孵育65分钟，显色30分钟。

保存条件：试剂2-8℃避光冷藏，同工酶抗体试剂密封防潮保存。

有效期：原装有效期7个月，开封后20天内有效。

特异性：特异性识别GP-BB亚型，与GP-II、GP-MM同工酶无交叉反应，亚型特异性高。

重复性：板内CV≤5.5%，板间CV≤7%，神经代谢指标检测精准。

注意事项：脑组织样本低温取材，避免酶失活，样本无组织残渣污染。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

公司正在出售的产品：

实验操作流程：

试剂盒室温回温 26min，稀释洗涤液，倍比稀释 GP-BB 标准品，取用酶标板条，剩余板条密封冷藏避光储存。

设置空白、标准品、待测样本三类孔位，标准品孔加标准液 50μL，样本孔上样待测样本 50μL，空白孔无添加。

样本与标准品孔加入酶偶联抗体液 100μL，封板后 37℃孵育 63min。

弃液洗板，洗涤液注满每孔浸泡 30s，拍干，循环洗板 5 次。

加入显色 A、B 液各 50μL，混匀后 37℃避光显色 15min。

滴加终止液 50μL 晃动混匀终止显色。

450nm 测吸光度，标准曲线法计算 GP-BB 浓度。