大鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA试剂盒

本试剂盒采用特异性抗原抗体结合的双抗体夹心ELISA技术检测大鼠GHbA1c含量。酶标板包被抗大鼠GHbA1c特异性抗体，加入预处理的血液样本及标准品后，样本中的糖化血红蛋白A1c与固相抗体特异性结合，洗板去除未结合血红蛋白及杂质，加入酶标记检测抗体形成免疫复合物，底物显色后通过吸光度检测，结合标准曲线精准测定大鼠GHbA1c的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度0.2%，可精准检测大鼠全血中糖化血红蛋白占比。

检测范围：0.5% - 18%，完全覆盖正常及糖尿病模型大鼠GHbA1c含量区间。

反应时间：总时长120分钟，样本预处理孵育90分钟，显色30分钟。

保存条件：全套试剂2-8℃冷藏，血红蛋白检测试剂避光保存，避免氧化。

有效期：未开封有效期8个月，开封后密封保存1个月内有效。

特异性：特异性识别糖化血红蛋白A1c，与普通血红蛋白、其他糖化蛋白无交叉反应。

重复性：板内CV≤5%，板间CV≤6.5%，血糖相关指标检测稳定性高。

注意事项：全血样本需抗凝处理，避免凝血，样本需新鲜检测，放置过久会导致数值偏差。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

试剂盒室温回温 35min，配制洗涤工作液，梯度稀释 GHbA1c 标准品，取出实验板条，剩余板条防潮密封冷藏。

设置空白孔、标准品孔、溶血预处理样本孔；标准品孔加标准溶液 50μL，样本孔加入稀释溶血样本 50μL，空白孔空置。

标准品与样本孔加入酶标记抗体 100μL，封板膜密封，37℃避光孵育 80min。

弃去孔内液体，洗涤液加满每孔浸泡 45s，拍干，连续洗板 6 次。

每孔分别滴加显色 A 液、B 液 50μL，震荡混匀，37℃避光显色 22min。

每孔加入终止液 50μL，充分混匀终止显色。

450nm 检测吸光度，拟合标准曲线计算 GHbA1c 含量。