大鼠烟碱型乙酰胆碱受体(N-AChR)ELISA试剂盒

本试剂盒基于竞争法ELISA检测原理，酶标板预先包被大鼠烟碱型乙酰胆碱受体(N-AChR)特异性抗原，待测样本中的N-AChR与包被抗原竞争结合有限的特异性抗体，再结合酶标记抗体完成反应体系构建，洗涤除去未结合组分后显色，样本中N-AChR含量越高，显色越弱，通过吸光度检测与标准曲线对照，实现样本定量检测。
基本参数‌：

产品名称：大鼠烟碱型乙酰胆碱受体(N-AChR)ELISA试剂盒

英文名称：N-AChR ELISA Kit
货号：Y-E1113

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度0.07ng/mL

检测范围：0.2ng/mL - 38ng/mL

反应时间：总反应时长120分钟

保存条件：2-8℃低温避光保存，受体抗体试剂-20℃保存

有效期：常规组件6个月，低温试剂12个月

特异性：特异性结合大鼠N-AChR，与毒蕈碱型乙酰胆碱受体无交叉反应

重复性：板内变异系数≤5.1%，板间变异系数≤7.1%

注意事项：神经组织样本需低温取材，受体蛋白易失活，快速处理检测
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒室温回温 35min，稀释浓缩洗涤液，梯度制备 N-AChR 标准品，待测组织上清 / 血清样本预处理。

标记酶标板孔型，空白孔加稀释液，标准孔加梯度标准溶液，样本孔加待测样本，每孔加入酶标记抗体液，密封封板。

37℃避光孵育 70min，充分完成抗原抗体特异性结合。

揭膜倒净废液，洗涤液浸泡微孔 35s，甩干，循环洗板 5 次，彻底拍干微孔残留洗液。

依次添加显色 A、B 底物液，震荡混匀，37℃避光显色 18min。

加入终止液终止酶促显色，摇匀酶标板。

酶标仪 450nm 检测吸光度，依托标准曲线定量 N-AChR 含量。
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