大鼠水通道蛋白2(AQP-2) ELISA试剂盒

本试剂盒基于经典双抗体夹心ELISA原理定量检测大鼠样本中的AQP-2水平。酶标板固相载体包被有大鼠AQP-2特异性单克隆抗体，加入待测样本与标准品后，样本内AQP-2抗原与固相抗体发生特异性免疫结合，洗板去除游离组分，随后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的AQP-2检测抗体，构建特异性免疫复合物，经底物催化显色、终止液终止反应后，检测吸光度数值，依据标准曲线回归方程，准确测定大鼠样本中AQP-2的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测限0.1ng/mL，对大鼠肾脏、尿液样本中低丰度AQP-2蛋白检测灵敏度极高。

检测范围：0.2ng/mL - 10ng/mL，适用于大鼠尿液、肾组织匀浆、血清样本的定量检测。

反应时间：总反应时长100分钟，样本一抗孵育70分钟，二抗孵育15分钟，显色15分钟。

保存条件：所有试剂组分2-8℃避光冷藏，洗涤液稀释后可2-8℃保存7天。

有效期：原装未拆封有效期8个月，多次开封取用后建议2周内使用完毕。

特异性：专一结合大鼠AQP-2抗原，与AQP1、AQP3、AQP4等亚型无交叉识别，特异性极强。

重复性：板内CV值≤5%，板间CV值≤7%，批次间实验数据一致性高。

注意事项：尿液样本需提前离心去除杂质，避免蛋白沉淀干扰检测，孵育温度需恒定37℃，温差不超过±1℃。
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

提前 25min 将试剂盒从冷藏环境取出放置室温回温，按说明书比例浓缩洗涤液用纯水稀释配成工作洗涤液，拆分所需酶标板条，其余板条防潮冷藏存放。

在酶标板上标记空白、标准品、待测样本组别，标准品孔添加倍比稀释完成的系列浓度标准品 50μL，样本孔上样预处理后的大鼠待测样本 50μL，空白孔空置。

除空白孔外所有孔加入酶标记抗体工作液 100μL，封板膜紧密封板，置于 37℃水浴箱避光孵育 55min。

撕掉封板膜，倒扣酶标板甩净孔中液体，每孔注满洗涤液浸泡 40s 后在吸水纸上彻底拍干，循环洗板 4 次。

每孔分别加注显色底物 A、B 液各 50μL，低速震荡酶标板 10s 混匀，37℃避光条件下显色 12min。

全部孔位加入终止液 50μL，终止酶促显色反应，水平晃动酶标板使孔内溶液充分混合。

酶标仪调至 450nm 检测波长，逐孔测定吸光值，拟合标准曲线换算得出样本 AQP-2 含量。