大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔固定有特异性抗大鼠AQP-0抗体。实验中，待测样本和标准品中的水通道蛋白0抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除未结合物质后，加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体，形成特异性免疫复合物。经底物显色、终止反应后检测吸光度，数值与样本AQP-0含量呈正相关，结合标准曲线可精准定量大鼠AQP-0的表达水平。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测下限0.2ng/mL，可精准检测晶状体微量AQP-0蛋白。

检测范围：0.5ng/mL - 95ng/mL，适配大鼠晶状体、眼组织、血清样本。

反应时间：总时长95分钟，抗原温育40分钟、酶标抗体温育30分钟、显色25分钟。

保存条件：2-8℃冷藏避光，所有组分严禁冷冻，防止蛋白空间结构破坏。

有效期：原装有效期12个月，多次取用后1个月内用完。

特异性：特异性识别大鼠AQP-0，与AQP1、AQP2等水通道蛋白无交叉反应。

重复性：板内CV≤7.2%，板间CV≤9.2%，膜蛋白检测重复性良好。

注意事项：眼晶状体样本需轻柔研磨，避免蛋白结构破坏；全程低温避光操作。
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 27min，稀释洗涤工作液，逐级稀释 AQP-0 标准品，酶标板编号分区，大鼠眼晶状体组织裂解后取上清待测。

标准孔加入 AQP-0 梯度标准液 50μL，样本孔加入晶状体裂解上清 50μL，空白孔添加基础稀释液 50μL，所有孔加入酶结合工作液 100μL，封膜密封。

37℃避光孵育 51min，完成夹心式免疫检测结合。

弃去孔内液体，洗涤液加满浸泡 41s，甩干洗板 4 次，洗除游离杂蛋白。

每孔滴加显色 A 液、B 液各 50μL，混匀后 37℃避光显色 16min。

加入终止液 50μL 终止显色反应，水平摇晃酶标板混匀体系。

450nm 测定各孔 OD 值，绘制标准曲线计算 AQP-0 蛋白含量。