大鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，酶标板微孔内预包被大鼠ECF特异性捕获抗体。待测样本和梯度标准品中的ECF抗原与固相抗体特异性免疫结合，洗孔清除游离杂质后，加入酶标记ECF检测抗体，形成稳定的夹心免疫复合物。后续经显色、终止、吸光度检测，依据标准曲线可精准测定大鼠样本中嗜酸粒细胞趋化因子的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测值0.25pg/mL，可精准检出微量ECF趋化因子。

检测范围：0.7pg/mL - 130pg/mL，适用于大鼠血清、肺组织、皮肤炎症组织样本。

反应时间：全程100分钟，样本温育40分钟、二抗温育35分钟、显色25分钟。

保存条件：2-8℃密封冷藏，所有试剂组分单独存放，避免交叉污染。

有效期：未开封有效期10个月，开盖后3周内完成检测。

特异性：专一识别大鼠ECF，与中性粒细胞趋化因子无交叉反应。

重复性：板内CV≤7.5%，板间CV≤9.5%，实验数据一致性高。

注意事项：炎症组织样本取材后立即低温保存，防止趋化因子快速降解失效。
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

试剂盒室温回温 28min，稀释洗涤缓冲液，梯度稀释 ECF 标准品，标记酶标板孔位，大鼠细胞培养上清样本离心去除杂质。

标准孔加入 ECF 标准稀释液 50μL，样本孔加入澄清上清样本 50μL，空白孔加稀释液 50μL，所有孔加入酶偶联抗体工作液 100μL，封膜密封。

37℃避光孵育 49min，完成免疫夹心捕获。

弃去孔内液体，洗涤液浸泡每孔 39s，甩干洗板 4 次，洗脱未结合游离物质。

每孔加入显色底物 A、B 各 50μL，混匀后 37℃避光显色 13min。

加入终止液 50μL 终止显色反应，小幅晃动酶标板混匀。

酶标仪 450nm 检测吸光度，计算样本 ECF 含量。