大鼠视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理，将纯化的大鼠RBP-4特异性抗体固定于酶标板表面作为固相载体。实验过程中，样本、标准品中的RBP-4抗原被固相抗体特异性捕获，洗去游离组分后，加入酶标记检测抗体构建夹心复合物。底物显色终止后检测吸光度，数值与样本RBP-4含量呈正相关，通过标准曲线可精准检测大鼠视黄醇结合蛋白4的含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测下限0.2ng/mL，精准检测低丰度RBP-4蛋白。

检测范围：0.5ng/mL - 90ng/mL，适用于大鼠血清、脂肪组织、肝组织样本。

反应时间：总时长95分钟，抗原温育40分钟、二抗温育30分钟、显色25分钟。

保存条件：2-8℃密封冷藏，核心抗体避光保存，禁止冷冻。

有效期：原装有效期12个月，多次取用后3周内用完。

特异性：专一识别大鼠RBP-4，与RBP家族其他亚型无交叉反应。

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%，代谢标志物检测重复性好。

注意事项：脂肪组织样本需充分脱脂处理，避免脂质干扰抗原抗体结合。
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。

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实验操作流程：

试剂盒常温平衡 26min，稀释洗涤工作液，逐级稀释 RBP-4 标准品，设定酶标板各类检测孔，大鼠腹腔液过滤后作为待测样本。

标准孔加入 RBP-4 梯度标准液 50μL，样本孔加入过滤待测腹腔液 50μL，空白孔添加稀释液 50μL，全孔加入酶结合工作液 100μL，密封封板。

37℃避光孵育 53min，特异性免疫结合反应。

去除封板弃液，洗涤液加满每孔浸泡 37s，甩干洗板 4 次，清除游离杂蛋白。

每孔依次添加显色 A 液、B 液各 50μL，混匀后 37℃避光显色 15min。

加入终止液 50μL 终止显色，水平振荡酶标板混匀体系。

酶标仪 450nm 测定吸光度，计算样本 RBP-4 浓度。