大鼠血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测原理，预先在酶标板包被大鼠血小板衍生生长因子(PDGF)特异性抗体，待测样本中的PDGF抗原被固相抗体特异性捕获，加入酶标记PDGF抗体形成完整免疫复合物，洗涤纯化反应体系后进行酶促显色反应，终止显色后检测吸光度，吸光度数值与样本PDGF含量成正比，结合标准曲线实现定量检测。
基本参数‌：

产品名称：大鼠血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒

英文名称：PDGF ELISA Kit
货号：Y-E1458

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度0.07ng/mL

检测范围：0.2ng/mL - 35ng/mL

反应时间：总反应时长110分钟

保存条件：2-8℃避光保存，标准品-20℃冷冻保存

有效期：试剂盒主体6个月，冷冻标准品6个月

特异性：广谱特异性识别大鼠PDGF总蛋白，与生长因子家族其他蛋白无交叉反应

重复性：板内变异系数≤4.9%，板间变异系数≤6.9%

注意事项：样本避免高温放置，生长因子易降解，孵育时间严格把控
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒室温静置 30min，稀释洗涤液，逐级稀释 PDGF 标准品，待测血清样本稀释处理。

设定空白、标准、样本孔，分别加入对应试剂与样本，每孔添加酶偶联工作液，封板膜封闭微孔。

37℃避光孵育 60min，全程避光防止底物提前分解。

揭膜倒液，洗涤液浸泡每孔 30s，甩干，洗板 5 次，彻底去除未结合游离试剂。

加入显色 AB 液混匀，37℃避光显色 14min。

加入终止液终止显色反应，摇匀酶标板。

酶标仪 450nm 检测吸光值，标准曲线定量 PDGF 含量。
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