大鼠血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心ELISA技术原理，将大鼠血栓调节蛋白(TM)特异性抗体固定于酶标板孔内，加入待测大鼠样本后，样本中的TM抗原与包被抗体特异性结合，再加入酶标记特异性抗体形成夹心免疫复合物，充分反应后洗涤洗净未结合物质，经底物显色、终止反应后，酶标仪检测吸光度，显色强度与样本中TM含量正相关，结合标准曲线实现TM的定量检测。
基本参数‌：

产品名称：大鼠血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒

英文名称：TM ELISA Kit
货号：Y-E1457

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度0.08ng/mL

检测范围：0.2ng/mL - 40ng/mL

反应时间：总反应时长90分钟

保存条件：所有组件2-8℃冷藏保存，严禁冷冻结冰

有效期：未开封完好保存6个月

特异性：特异性结合大鼠TM蛋白，与内皮细胞同源蛋白无交叉反应

重复性：板内变异系数≤5.5%，板间变异系数≤7.5%

注意事项：避免样本溶血，溶血样本会干扰显色结果，试剂混匀禁止剧烈震荡
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 28min，稀释洗涤液，梯度配制 TM 标准品溶液，分离制备大鼠待测血清样本。

划分酶标板孔位，标准孔加梯度 TM 标准液，样本孔加稀释后血清，空白孔加基础稀释液，每孔加入酶偶联试剂，覆膜封口。

37℃恒温避光孵育 60min，防止板条移位造成孔间交叉污染。

撕掉封板膜，倒净废液，洗涤液浸泡每孔 30s，甩干，循环洗板 5 次，吸水纸拍干微孔。

依次添加显色 A、B 底物液，震荡混匀，37℃避光显色 16min。

加入终止液终止显色，摇匀酶标板。

450nm 波长检测 OD 值，根据标准曲线定量样本 TM 浓度。
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