大鼠肾损伤分子1(Kim-1)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理，酶标板微孔内固定有纯化的大鼠Kim-1特异性抗体。待测样本与梯度标准品中的Kim-1抗原可被固相抗体特异性捕获，洗涤去除未结合物质后，加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体，形成稳定的夹心免疫复合物。底物显色后终止反应，检测吸光度值，其数值与样本Kim-1含量正相关，通过标准曲线可精准定量大鼠肾损伤分子1的表达水平。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测下限0.2ng/mL，可早期检出微量肾损伤标志物。

检测范围：0.5ng/mL - 130ng/mL，适用于大鼠尿液、血清、肾组织样本。

反应时间：总时长105分钟，样本温育45分钟、二抗温育35分钟、显色25分钟。

保存条件：2-8℃避光密封保存，所有组分禁止冷冻，防止蛋白变性。

有效期：原装有效期12个月，多次取用后1个月内用完。

特异性：专一结合大鼠Kim-1，与其他肾脏蛋白标志物无交叉反应。

重复性：板内CV≤7.5%，板间CV≤9.5%，早期肾损伤检测精度高。

注意事项：尿液样本需离心去除沉淀，浑浊尿液需过滤后检测；样本及时检测避免降解。
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 27min，稀释洗涤工作液，逐级稀释 Kim-1 标准品，酶标板编号分区，大鼠尿液样本过滤稀释后待用。

标准孔加入梯度 Kim-1 标准液 50μL，样本孔加入稀释尿液样本 50μL，空白孔加稀释液 50μL，所有孔加入酶结合工作液 100μL，封膜密封。

37℃避光孵育 50min，抗原与固相抗体特异性结合。

弃去孔内液体，洗涤液加满浸泡 36s，甩干洗板 4 次，洗脱未结合杂蛋白。

每孔加注显色 A 液、B 液各 50μL，混匀后 37℃避光显色 13min。

加入终止液 50μL 终止显色，轻摇酶标板混匀反应体系。

酶标仪 450nm 测定吸光度，计算样本 Kim-1 浓度。