大鼠神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒

本试剂盒基于经典双抗体夹心ELISA原理，酶标板微孔预先固定纯化的大鼠NT-3特异性抗体。检测时，样本与标准品中的NT-3抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除游离杂质后，加入酶标记的NT-3检测抗体，构建夹心式免疫复合物。经底物显色、终止反应后检测吸光度，吸光度数值随样本NT-3含量升高而增大，通过标准曲线拟合可精准定量大鼠样本中NT-3的表达浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测下限0.25ng/mL，可检测低丰度NT-3蛋白表达。

检测范围：0.7ng/mL - 110ng/mL，适配大鼠神经组织、血清、干细胞培养上清。

反应时间：总时长105分钟，抗原温育45分钟、二抗温育35分钟、显色25分钟。

保存条件：2-8℃避光密封保存，核心抗体组分禁止室温放置超过1小时。

有效期：原装有效期12个月，开盖后2周内完成检测。

特异性：专一结合大鼠NT-3，与NT-4、NGF等神经营养因子无交叉反应。

重复性：板内CV≤7.5%，板间CV≤9.5%，实验稳定性良好。

注意事项：干细胞上清样本需过滤处理，避免细胞杂质干扰抗原结合反应。
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。

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实验操作流程：

试剂盒常温放置 29min，稀释浓缩洗涤液，配制 NT-3 梯度标准溶液，拆分酶标板条并编号分类，制备大鼠神经组织提取上清。

标准孔加入不同浓度 NT-3 标准液 50μL，样本孔加入待测组织上清 50μL，空白孔加稀释液 50μL，全孔加入酶标记二抗工作液 100μL，密封封板。

37℃避光孵育 58min，固相载体捕获靶标抗原。

去除封板弃液，洗涤液浸泡每孔 37s，甩干后洗板 4 次，去除非特异结合杂质。

每孔加入显色 A、B 液各 50μL，混匀后 37℃避光显色 14min。

加入终止液 50μL 终止显色反应，轻晃酶标板混匀。

450nm 波长读取吸光值，计算样本 NT-3 含量。