大鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心ELISA检测原理，将特异性抗大鼠NSE抗体包被于酶标板微孔表面。加入梯度标准品和待测样本后，其中的NSE抗原与固相抗体特异性结合，洗去未结合组分后，加入辣根过氧化物酶标记的二抗，形成特异性免疫复合物。底物显色后终止反应，检测450nm波长下吸光度，依据吸光度与NSE浓度的正相关关系，结合标准曲线定量检测大鼠样本中NSE的含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测值0.3ng/mL，可精准检出神经损伤低浓度NSE标志物。

检测范围：0.8ng/mL - 150ng/mL，适用于大鼠血清、脑组织、细胞上清样本。

反应时间：全程85分钟，样本温育30分钟、酶标二抗温育30分钟、显色25分钟。

保存条件：试剂盒2-8℃冷藏，稀释洗涤液4℃可保存7天，不可冷冻。

有效期：未开封有效期9个月，开封后1个月内使用完毕。

特异性：特异性识别大鼠NSE，与普通烯醇化酶、肿瘤烯醇化酶无交叉反应。

重复性：板内CV≤6.2%，板间CV≤8.2%，损伤标志物检测精度达标。

注意事项：溶血样本会造成结果假性升高，需使用无溶血样本；显色需严格定时终止。
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 31min，配制洗涤工作液，逐级稀释 NSE 标准品，酶标板标记空白、标准、样本孔，大鼠血清样本提前稀释处理。

标准品孔加入梯度 NSE 标准液 50μL，样本孔加入稀释后待测样本 50μL，空白孔加稀释缓冲液 50μL，每孔加入酶结合物 100μL，封膜封口。

37℃避光孵育 60min，夹心免疫反应充分进行。

撕除封板膜倒净废液，洗涤液注满每孔浸泡 33s，甩干洗板 5 次，拍干残留液体。

每孔添加显色 A 液、B 液各 50μL，混匀后 37℃避光显色 16min。

滴加终止液 50μL 终止显色，水平震荡酶标板混匀。

酶标仪 450nm 测 OD 值，标准曲线换算样本 NSE 浓度。