大鼠血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理，微孔板固相载体包被大鼠VEGF-D特异性捕获抗体，孵育加入标准品及大鼠待测样本，样本中的VEGF-D抗原与固相抗体特异性免疫结合，充分反应后洗涤清除未结合组分，加入酶标记VEGF-D检测抗体孵育结合，形成稳定免疫复合物，经底物显色、终止反应后测定吸光度，吸光度数值与样本中VEGF-D含量成正比，对照标准曲线实现定量检测。
基本参数‌：

产品名称：大鼠血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA试剂盒

英文名称：VEGF-D ELISA Kit
货号：Y-E1545

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度≤3pg/mL，可精准定量大鼠VEGF-D微量表达

检测范围：7pg/mL - 950pg/mL，覆盖大鼠血管、淋巴重塑模型浓度范围

反应时间：全流程反应耗时100分钟，反应充分，检测精度高

保存条件：所有试剂组分2-8℃避光冷藏，酶结合物严禁冻融

有效期：未开封试剂盒有效期6个月

特异性：专一性结合大鼠VEGF-D，与VEGF家族其他亚型无交叉干扰

重复性：板内变异系数≤7%，板间变异系数≤9%

注意事项：显色反应时长需严格把控，超时会导致显色过深，影响定量结果。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒室温静置 28min，按需取用酶标板条，划分不同实验组别孔位。

标准品倍比稀释制备梯度浓度，标准孔加 55μL 标品溶液，样本孔上样 55μL 大鼠细胞培养液上清，空白孔补齐稀释液。

每孔加入酶标记抗体液 110μL，封板避光 37℃孵育 69min。

洗板 6 次，洗涤液浸泡 37s / 次，彻底清除非特异性吸附杂质。

底物显色液 100μL 加入微孔，避光室温显色 20min。

60μL 终止液终止酶促反应，轻摇酶标板混匀液体。

450nm 检测吸光度，定量样本 VEGF-D 水平。
公司正在出售的产品：