大鼠肉毒碱脂酰转移酶(CACT)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理，以特异性抗大鼠CACT单克隆抗体为固相包被抗体，固定于酶标板表面。实验过程中，样本与标准品中的CACT抗原可与固相抗体特异性免疫结合，洗涤去除游离杂质后，加入辣根过氧化物酶标记的CACT检测抗体，完成复合物组装。后续通过底物催化显色、终止反应，利用酶标仪检测吸光度，依据标准品浓度与对应吸光度绘制标准曲线，即可定量检测大鼠样本中CACT的表达含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测值0.2U/L，可精准检出低浓度CACT活性样本。

检测范围：0.5U/L - 20U/L，适用于大鼠肝组织、心肌组织匀浆及细胞上清样本。

反应时间：总反应时长110分钟，样本温育40分钟、酶结合物温育30分钟、显色20分钟。

保存条件：所有试剂组分统一2-8℃密封冷藏，显色液、终止液单独避光存放。

有效期：原装未开封有效期12个月，开盖后试剂建议2周内使用完毕。

特异性：专一结合大鼠CACT蛋白，与大鼠脂酰转移酶家族其他亚型无交叉识别。

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%，批次间检测数据偏差极小。

注意事项：组织匀浆需充分离心去除杂质，避免蛋白沉淀影响反应；试剂使用前需回温至室温。
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

取出试剂盒所有组分室温放置 25min，按说明书比例稀释浓缩洗涤液，梯度配制 CACT 系列标准品，拆分酶标板条设定对照孔与检测孔。

标准孔添加梯度 CACT 标准溶液 50μL，待测孔加入预处理大鼠细胞裂解液样本 50μL，空白孔添加基础稀释液 50μL，所有孔直接加入酶标记抗体工作液 100μL，密封封板。

置于 37℃恒温孵育箱避光温育 45min，完成固相抗原抗体夹心结合反应。

去除封板膜，倾倒孔中废液，每孔注满洗涤液浸泡 40s 后倒扣拍干，连续洗板 4 次，彻底去除未结合游离蛋白。

每孔分别加注显色底物液 A、B 各 50μL，低速振荡混匀，37℃避光环境下显色 12min。

快速向每孔滴加终止溶液 50μL，终止底物催化显色，轻微振荡板条保证混匀。

酶标仪调至 450nm 波长读取各孔吸光数值，拟合标准曲线换算样本 CACT 活性浓度。