大鼠热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理，适配大鼠热休克蛋白70（HSP-70）的微量定量检测。固相酶标板固定HSP-70特异性捕获抗体，样本、标准品中的HSP-70抗原与固相抗体特异性结合，孵育洗板后加入酶标检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体夹心复合物。酶促底物显色后，显色深浅与HSP-70含量正相关，终止反应后检测吸光度，结合标准曲线完成定量分析。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测灵敏度0.1ng/mL，经典高灵敏应激蛋白检测试剂盒。

检测范围：0.3ng/mL - 150ng/mL，适配大鼠各类应激、损伤、修复实验模型。

反应时间：标准反应时长100分钟，操作标准化，结果稳定。

保存条件：2 - 8℃避光冷藏保存，所有试剂严禁高温、冷冻存放。

有效期：未拆封试剂盒有效期12个月，常规保存无活性衰减。

特异性：特异性结合大鼠HSP-70，与HSP家族其他分子量蛋白无交叉反应。

重复性：板内CV≤4.8%，板间CV≤6.8%，重复性极佳。

注意事项：样本避免热暴露，防止HSP-70异常诱导表达；样本无杂质、无溶血；严格把控每步孵育时长。
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

1. 试剂盒组分室温回温 30min，配制洗涤液；热应激处理细胞上清离心去除细胞残渣。

2. 酶标板分区设置孔位，标准品孔加入梯度 HSP-70 标准品 50μL，样本孔加入待测上清 50μL，空白孔空置。

3. 一步法加入酶结合物工作液 100μL 至检测孔，封板膜封口。

4. 37℃避光孵育 71min，恒温静置孵育。

5. 弃去孔内液体，洗涤液浸泡 34s，洗板 5 次，倒置拍干微孔。

6. 加入显色液 A、B 各 50μL，混匀后 37℃避光显色 19min。

7. 加入终止液混匀终止底物显色，450nm 测定吸光度，对照标准曲线计算 HSP-70 含量。