大鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心ELISA原理检测大鼠热休克蛋白90（HSP-90），酶标板微孔内预包被HSP-90特异性捕获抗体。检测过程中，样本与标准品中的HSP-90抗原结合于固相抗体，孵育洗板去除未结合物质后，加入酶标记检测抗体形成特异性免疫复合物。后续底物显色反应的吸光度值与样本中HSP-90的浓度呈正相关，通过标准曲线回归计算，可精准定量靶标蛋白含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测限值0.15ng/mL，可精准检测大鼠结构型、诱导型HSP-90蛋白。

检测范围：0.4ng/mL - 140ng/mL，覆盖大鼠肿瘤增殖、应激损伤、蛋白稳态紊乱模型。

反应时间：全流程反应110分钟，酶联反应充分彻底。

保存条件：2 - 8℃冷藏避光，开封后试剂1个月内使用完毕。

有效期：原装试剂盒有效期12个月，低温保存稳定。

特异性：特异性识别大鼠HSP-90蛋白，无家族交叉反应，检测专一性强。

重复性：板内CV≤5.3%，板间CV≤7.3%，数据一致性良好。

注意事项：肿瘤组织样本充分匀浆裂解；样本避免反复冻融；洗板均匀彻底，避免残留干扰。
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

1. 试剂盒试剂室温平衡 33min，稀释浓缩洗涤液；胞质蛋白提取样本离心去除不溶物。

2. 划分酶标板孔位，标准品孔添加梯度 HSP-90 标准品 50μL，样本孔加入待测蛋白上清 50μL，空白孔无添加。

3. 除空白孔外每孔加入酶标记二抗工作液 100μL，封板密封防污染。

4. 37℃避光孵育 77min，稳定完成免疫复合物组装。

5. 掀开封板弃液，洗涤液浸泡微孔 39s，洗板 6 次，吸水纸彻底拍干。

6. 加入显色 A、B 液各 50μL，轻微震荡混匀，37℃避光显色 22min。

7. 终止液终止反应，450nm 读取 OD 值，依据标准曲线定量 HSP-90 表达水平。