大鼠热休克蛋白47(HSP47)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，检测大鼠热休克蛋白47（HSP47）浓度。微孔板预先包被HSP47特异性捕获抗体，待测样本中的HSP47抗原可与固相抗体特异性结合，孵育洗板后加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体，形成稳定的免疫夹心结构。底物酶促显色后，终止反应并检测吸光度，数值大小与样本中HSP47含量正相关，通过标准曲线可实现精准定量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测灵敏度0.18ng/mL，可精准检测大鼠纤维化组织中HSP47表达。

检测范围：0.5ng/mL - 95ng/mL，适配大鼠组织纤维化、胶原合成异常模型。

反应时间：全流程90分钟快速检测，适配大批量纤维化样本检测。

保存条件：2 - 8℃避光冷藏，试剂密封存放，防止受潮、污染。

有效期：未开封有效期8个月，恒定低温保存稳定。

特异性：特异性靶向大鼠HSP47，与其他胶原结合蛋白、热休克蛋白无交叉反应。

重复性：板内CV≤6%，板间CV≤8%，实验重复性良好。

注意事项：纤维化组织样本需充分裂解，去除胶原杂质；实验全程避免高温；洗板步骤规范，保证检测精准。
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。

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实验操作流程：

1. 试剂盒全部试剂室温放置 32min，配制洗涤工作液；胶原相关组织匀浆离心过滤备用。

2. 排布酶标板孔位，标准品孔加入梯度 HSP47 标准品 50μL，样本孔加入待测匀浆上清 50μL，空白孔空置。

3. 检测孔直接添加酶标记抗体工作液 100μL，严实封板防止挥发。

4. 37℃恒温避光孵育 76min，充分进行一步法免疫反应。

5. 弃净孔内液体，洗涤液浸泡 37s，洗板 6 次，微孔拍干无残留液体。

6. 每孔加入显色 A、B 液各 50μL，混匀后 37℃避光显色 21min。

7. 加入终止液终止显色，450nm 读取吸光度，计算样本 HSP47 含量。