大鼠胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)ELISA试剂盒

本试剂盒采用经典双抗体夹心酶联免疫吸附技术原理，微孔板固相包被大鼠TARC/CCL17特异性捕获抗体，孵育加入标准品与待测样本后，样本中的TARC/CCL17抗原与固相抗体特异性结合，洗去未结合组分后，加入酶标记的检测抗体与之结合，形成稳定的免疫夹心复合物，后续通过底物显色、终止反应步骤，利用酶标仪检测各孔吸光度，吸光度大小与样本中TARC/CCL17的含量成正比，通过拟合标准曲线即可实现对样本中该趋化因子的定量检测。
基本参数‌：

产品名称：大鼠胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)ELISA试剂盒

英文名称：TARC ELISA Kit
货号：Y-E1048

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度≤1.5pg/mL，可检测大鼠组织液、血清中微量趋化因子表达

检测范围：3pg/mL - 200pg/mL，适配大鼠免疫炎症模型样本检测需求

反应时间：全流程反应耗时110分钟，双温育体系，保证抗原抗体充分结合

保存条件：试剂2-8℃避光冷藏，标准品稀释后需分装冻存，避免反复冻融失效

有效期：原装未拆封试剂盒有效期6个月，开封后组分单独密封保存，1个月内使用完毕

特异性：特异性结合大鼠CCL17，与CC家族其他趋化因子（CCL2、CCL5等）无明显交叉反应

重复性：板内变异系数≤6%，板间变异系数≤8%，实验数据稳定可靠

注意事项：炎症样本需低温离心处理，去除杂质；温育温度严格控制在37℃，温度偏差会直接影响结合效率与检测精度。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒全部试剂室温平衡 35min，拆分酶标板条，预留空白对照孔、标准曲线孔、待测样品孔。

标准品复溶后进行梯度稀释，每标准孔加入 50μL 梯度标准液，样本孔加入 50μL 大鼠细胞上清样本，空白孔加稀释液。

每孔加入酶标记二抗工作液 100μL，封膜密封微孔板，37℃避光孵育 65min。

洗板机自动洗板，每孔洗涤液浸泡 35s，共洗涤 5 轮，倒置拍干微孔内残余液体。

每孔加入底物显色混合液 100μL，避光 37℃条件下显色 18min。

加入 50μL 终止液终止显色，水平晃动酶标板使孔内液体充分混匀。

酶标仪 450nm 检测 OD 值，绘制标准曲线计算样本 TARC/CCL17 含量。
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