大鼠性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心ELISA检测原理，将高特异性的大鼠SHBG单克隆抗体固定于微孔板固相载体上，加入梯度标准品及待测大鼠血清、组织等样本后，样本中的SHBG抗原与固相抗体发生特异性免疫结合，洗板去除游离杂质后，加入辣根过氧化物酶标记的SHBG检测抗体，形成特异性免疫夹心复合物，经底物催化显色、终止反应后，利用酶标仪检测吸光度，样本OD值与SHBG浓度呈正比，依托标准曲线可精准测定样本中性激素结合球蛋白的含量。
基本参数‌：

产品名称：大鼠性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒

英文名称：SHBG ELISA Kit
货号：Y-E1372

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度≤0.2nmol/L，可精准检测大鼠血清中低浓度SHBG含量

检测范围：0.5nmol/L - 100nmol/L，覆盖大鼠生理、病理状态下SHBG正常表达区间

反应时间：全流程实验耗时85分钟，操作简便，温育时长可控，适配批量样本检测

保存条件：试剂盒整体2-8℃冷藏保存，酶标板密封防潮存放，禁止高温、冷冻环境放置

有效期：未开封试剂盒有效期6个月，恒温恒湿条件下存放可维持试剂最佳活性

特异性：特异性识别大鼠SHBG，与雄激素、雌激素等性激素及结合蛋白无交叉结合反应

重复性：板内、板间变异系数均＜8%，实验重复性佳，数据误差符合科研检测标准

注意事项：样本需避免反复冻融，否则会导致蛋白变性影响检测结果；实验全程使用无酶无污染耗材，终止液为酸性试剂，避免接触皮肤。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒提前室温回温 28min，取出酶标板，规划排布实验孔位，粘贴孔位标签区分组别。

冻干标准品用稀释液复溶后梯度稀释，标准孔加 55μL 梯度标品，样本孔上样 55μL 大鼠体液待测样本，空白孔补稀释液。

每孔加入辣根过氧化物酶标记检测液 110μL，封板后置于 37℃恒温箱孵育 55min。

弃去孔中反应液，洗板液灌满微孔，浸泡 25s 后甩干，重复洗板 4 次，吸水纸吸干板底水分。

单孔先后加入显色液 A 50μL、显色液 B 50μL，避光 37℃避光反应 12min。

滴加 55μL 终止液终止反应，轻微振荡酶标板 30s 混匀体系。

450nm 波长酶标仪读数，依托标准曲线计算 SHBG 样本浓度数值。
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