大鼠纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，针对大鼠TAFI建立特异性检测体系。酶标板包被TAFI特异性捕获抗体，待测样本中的TAFI抗原与固相抗体结合后，加入酶标记检测抗体形成夹心复合物，洗涤去除游离组分后进行底物显色。样本中TAFI浓度越高，显色产物越多、吸光度越高，依据标准曲线可完成精准定量检测。
基本参数‌：

产品名称：大鼠纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)ELISA试剂盒

英文名称：TAFI ELISA Kit
货号：Y-E1210

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度≤2.8pg/mL

检测范围：5.5pg/mL - 240pg/mL

反应时间：全程130分钟，分步孵育70分钟、40分钟，显色20分钟

保存条件：2-8℃密封冷藏，所有试剂避光存放

有效期：原装有效期8个月，开封后15天内完成检测

特异性：特异性结合大鼠TAFI蛋白，与凝血酶、纤溶相关因子无交叉反应

重复性：板内CV≤5%，板间CV≤7%

注意事项：避免凝血不完全样本，杂质会干扰抗原抗体结合；实验耗材需无凝血污染。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

板条室温静置 36min，梯度稀释 TAFI 标准品，血浆样本稀释预处理，空白孔补稀释液，每孔 50μL。

每孔加入酶标记抗体复合物 50μL，封板封口，37℃孵育 82min。

洗板 5 次，每次浸泡 41s，彻底清除未结合游离组分。

显色底物 A、B 各 50μL 依次加入，避光显色 25min。

加入终止液 50μL 终止显色反应。

450nm 波长酶标仪测定各孔 OD 值。

标准曲线定量换算稀释比例，得到 TAFI 样本含量。
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