大鼠高灵敏度促甲状腺激素(U-TSH)ELISA试剂盒

本试剂盒采用高灵敏度双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理，酶标板包被高特异性大鼠U-TSH捕获抗体，通过优化抗体配对与反应体系，提升检测灵敏度，加入标准品和待测大鼠血清样本后，样本中的微量U-TSH抗原与固相抗体特异性结合，洗板去除干扰杂质，加入高活性酶标检测抗体形成免疫复合物，经精准洗涤后底物显色，显色强度与U-TSH浓度呈正相关，终止反应后通过高精度标准曲线，定量检测样本中微量的U-TSH含量。
基本参数‌：

产品名称：大鼠高灵敏度促甲状腺激素(U-TSH)ELISA试剂盒

英文名称：U-TSH ELISA Kit
货号：Y-E1242

规格：48T/96T

灵敏度：超高灵敏度，最低检测限0.01mIU/L，可检测大鼠极低浓度TSH

检测范围：0.02mIU/L～10mIU/L，覆盖大鼠甲状腺功能异常模型全浓度区间

反应时间：总时长130分钟，抗体孵育100分钟，显色30分钟

保存条件：2～8℃避光冷藏，全套试剂严禁冷冻、高温放置

有效期：原装有效期6个月，开封后20天内用完，保证超高灵敏度

显色系统：超高灵敏专用TMB显色体系，低浓度样本显色无盲区

检测波长：450nm精准检测波长，570nm高精度校正

标准曲线绘制：8梯度超稀标准浓度，四参数拟合，R²≥0.998，超高拟合精度

特异性：专一识别大鼠U-TSH，与LH、FSH等垂体激素无交叉反应

重复性：板内CV≤3%，板间CV≤5%，重复性行业顶尖

注意事项：血清样本无溶血、无脂血，保证超高精准度；实验环境无粉尘、无污染；所有试剂精准配比；孵育时间、温度严格标准化，细微偏差会影响微量检测结果。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒全部试剂室温平衡 40min，浓缩洗涤液 1:30 稀释，大鼠血清无溶血、脂血，单次分装使用。

高灵敏包被酶标板每孔精准加入 100μL 梯度 U-TSH 标准品、大鼠血清、空白稀释液。

一步高亲和力酶标记结合液 100μL / 孔，封板膜完全密封，37℃恒温避光孵育 90min。

弃去全部反应液，洗涤液加满微孔浸泡 50s，重复洗涤 6 次，吸水纸垂直用力拍干微孔内全部残留液体。

避光环境加入高灵敏 TMB 显色液 100μL，37℃避光精准显色 22min，严控显色时长避免信号过饱和。

每孔快速加入 50μL 专用终止液，水平轻晃酶标板 40s 充分中和显色体系。

10min 内以 450nm 为主波长、600nm 为参比波长读取各孔 OD 值，拟合标准曲线计算微量 U-TSH 浓度。
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