大鼠白介素1β (IL-1β)ELISA试剂盒

双抗体夹心酶联免疫吸附试验，固相微孔板包被抗大鼠 IL-1β 专属捕获抗体，样本 IL-1β 结合固相抗体，洗去未结合杂蛋白后加入酶标记抗 IL-1β 检测抗体构建夹心复合物，显色测定吸光度，标准曲线单独定量 IL-1β 含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测灵敏度≤1.5pg/mL

检测范围：3pg/mL - 270pg/mL

反应时间：孵育120分钟，二抗反应60分钟，避光显色15分钟

保存条件：2-8℃避光冷藏保存，底物液、终止液单独避光存放

有效期：未开封有效期6个月

显色系统：高灵敏度TMB显色体系

检测波长：450nm主波长检测

标准曲线绘制：倍比稀释IL-1β标准品，检测OD值，四参数拟合绘制标准曲线，换算样本浓度

特异性：专一识别大鼠IL-1β，与IL-1α及其他炎症因子无交叉反应

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%

注意事项：1. 避免IL-1α试剂交叉混用；2. 样本反复冻融会导致蛋白失活，需杜绝；3. 显色定时精准，保证结果一致性；4. 洗板干净无残留。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

公司正在出售的产品：

实验操作流程：

试剂平衡：试剂盒室温平衡 22min，20 倍洗涤液稀释混匀，底物避光保存。

标准品稀释：IL-1β 标准品溶解配置 6 组梯度，空白零孔设置。

样本上样：标准孔 50μL 标准液，炎症巨噬细胞上清、脑组织匀浆 50μL 上样。

孵育反应：每孔 50μL HRP 标记 IL-1β 抗体，封膜 37℃避光孵育 59min。

洗板：洗涤液浸泡 30s，拍干，洗板 5 次。

显色：TMB 底物各 50μL，避光 37℃反应 14min。

终止检测：终止液混匀，8min 内 450nm 读数，计算 IL-1β 浓度。