大鼠白介素13(IL-13)ELISA试剂盒

双抗体夹心酶联免疫吸附试验，固相微孔板预包被抗大鼠 IL-13 捕获抗体，样本 IL-13 蛋白结合固定抗体，洗涤去除未结合组分后加入酶标记抗 IL-13 检测抗体构建夹心免疫复合物，显色测吸光度，标准曲线定量 IL-13 浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测灵敏度≤1pg/mL

检测范围：2pg/mL - 220pg/mL

反应时间：孵育120分钟，二抗反应60分钟，避光显色15分钟

保存条件：2-8℃冷藏避光，所有组分禁止冷冻、高温放置

有效期：未开封有效期6个月

显色系统：优化型TMB显色系统，背景低、灵敏度高

检测波长：450nm检测吸光度

标准曲线绘制：标准品梯度稀释，测定OD值，四参数拟合绘制标准曲线，换算样本IL-13含量

特异性：专一识别大鼠IL-13，与IL-4、IL-5等Th2型细胞因子无交叉反应

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%

注意事项：1. 浑浊、溶血样本需预处理或弃用；2. 加样精准，孔间误差最小化；3. 洗板规范，无残留洗液；4. 试剂恢复室温后再实验。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

试剂平衡：试剂盒室温复温 25min，20× 洗涤液蒸馏水稀释，酶结合物混匀。

标准品稀释：IL-13 冻干标准品溶解配置 6 个梯度，现配现用。

样本上样：标准孔 50μL 梯度标准液，气道免疫细胞上清 50μL 上样。

酶结合物孵育：每孔 50μL HRP 标记 IL-13 抗体，封膜 37℃避光孵育 60min。

洗板：洗涤液浸泡 31s，拍干，循环洗板 5 次。

显色：TMB 底物各 50μL，避光 37℃孵育 15min。

终止检测：终止液混匀，8min 内 450nm 读数，换算 IL-13 浓度。