大鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒

双抗体夹心 ELISA 法，微孔板包被仅识别 IL-12 P70 异二聚体的捕获抗体，样本完整 IL-12 P70 结合固相抗体，洗板后加入 HRP 标记抗 P70 检测抗体形成夹心复合物，TMB 显色读取吸光度，仅定量功能性 IL-12 异二聚体。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测灵敏度≤1.8pg/mL

检测范围：3.6pg/mL - 300pg/mL

反应时间：恒温孵育120分钟，酶标二抗反应60分钟，显色20分钟

保存条件：2-8℃避光冷藏保存，底物液单独避光存放

有效期：原装试剂盒有效期6个月

显色系统：TMB底物显色，硫酸终止液终止

检测波长：450nm主波长检测

标准曲线绘制：梯度稀释P70标准品，检测OD值，四参数拟合绘制标准曲线，计算样本浓度

特异性：特异性识别大鼠IL-12完整P70异二聚体，不识别游离P40亚基，无其他细胞因子交叉反应

重复性：板内CV≤8%，板间CV≤10%

注意事项：1. 样本需新鲜制备，低温保存；2. 显色反应严格避光、定时；3. 杜绝试剂交叉污染；4. 实验耗材无热源、无酶污染。
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

试剂平衡：试剂盒室温放置 27min，洗涤液 1:20 稀释，全程避光操作。

标准品制备：IL-12 P70 异二聚体冻干标准品梯度稀释 7 个梯度，双复孔。

加样：标准孔 50μL 标准品，免疫细胞培养上清 50μL 加入检测孔。

酶标抗体孵育：每孔 50μL HRP-P70 抗体，密封 37℃避光孵育 71min。

洗板：洗涤液浸泡 39s，拍干，洗板 6 次。

显色：底物 A、B 各 50μL，避光 37℃显色 21min。

终止读数：终止液混匀，10min 内 450nm 测 OD 值，计算完整 IL-12 P70 含量。