大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒

双抗体夹心酶联免疫吸附原理，微孔板包被抗大鼠 IL-12 P40 亚基特异性捕获抗体，样本游离 P40 亚基结合固相抗体，洗除杂蛋白后加入酶标记抗 P40 检测抗体形成夹心复合物，底物显色测 OD 值，定量 IL-12 P40 单体含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测灵敏度≤2pg/mL

检测范围：4pg/mL - 320pg/mL

反应时间：样本孵育120分钟，二抗孵育60分钟，避光显色15分钟

保存条件：2-8℃避光冷藏，试剂密封防潮，禁止冷冻

有效期：未开封有效期6个月

显色系统：高灵敏度TMB显色体系

检测波长：450nm读取OD值

标准曲线绘制：标准品倍比稀释，检测对应吸光度，四参数拟合绘制标准曲线，计算P40亚基浓度

特异性：特异性识别大鼠IL-12 P40亚基，不与P70亚基及其他白介素交叉反应

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%

注意事项：1. 避免样本反复冻融，保护蛋白活性；2. 洗板充分，消除非特异性吸附；3. 孵育温度恒定，保证反应一致性；4. 独立批次试剂单独使用。
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

试剂平衡：试剂盒室温平衡 22min，20 倍洗涤液稀释混匀，底物避光保存。

标准品稀释：IL-12 P40 标准品溶解配置 6 组梯度，空白零孔。

样本上样：标准孔 50μL 标准液，树突状细胞上清样本 50μL 上样。

孵育反应：每孔 50μL HRP 标记 P40 亚基特异性抗体，封膜 37℃避光孵育 58min。

洗板：洗涤液浸泡 30s，拍干，洗板 5 次。

显色：TMB 底物各 50μL，避光 37℃反应 14min。

终止检测：终止液混匀，7min 内 450nm 读数，计算 IL-12 P40 含量。