大鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA试剂盒

双抗体夹心 ELISA 原理，固相微孔板包被抗大鼠 IFI16 捕获抗体，细胞裂解样本中 IFI16 蛋白吸附于微孔，洗除杂蛋白后加入酶标记抗 IFI16 检测抗体构建夹心免疫复合物，底物显色测吸光度，对照标准曲线完成定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测灵敏度≤0.2ng/mL

检测范围：0.5ng/mL - 50ng/mL

反应时间：样本孵育120分钟，酶标二抗孵育60分钟，避光显色20分钟

保存条件：试剂盒整体2-8℃冷藏，底物液避光保存，禁止低温冷冻

有效期：未开封有效期6个月，开封后组分单独密封可保存30天

显色系统：优化型TMB显色系统，显色梯度清晰，灵敏度高

检测波长：450nm主波长检测

标准曲线绘制：梯度标准品检测OD值，四参数Logistic拟合绘制标准曲线，计算样本蛋白浓度

特异性：特异性结合大鼠IFI16/p16蛋白，与大鼠同类干扰素诱导蛋白无交叉反应

重复性：板内变异系数≤7%，板间变异系数≤9%

注意事项：1. 样本需澄清无溶血、无浑浊，否则干扰检测结果；2. 加样避免触碰孔壁，防止挂壁影响反应；3. 显色时间严格统一，避免孔间色差；4. 过期试剂禁止使用。
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

试剂平衡：试剂盒室温复温 24min，20× 洗涤液蒸馏水稀释，酶结合物混匀无沉淀。

标准品稀释：IFI16 冻干标准品溶解配置 6 个梯度，现配现用。

样本上样：标准孔 50μL 梯度标准液，免疫细胞裂解液样本 50μL 上样。

酶结合物孵育：每孔 50μL HRP 标记 IFI16 抗体，封膜 37℃避光孵育 61min。

洗板：洗涤液浸泡 32s，拍干，循环洗板 5 次。

显色：TMB 底物各 50μL，避光 37℃孵育 15min。

终止检测：终止液混匀，7min 内 450nm 读数，换算 IFI16 蛋白含量。