大鼠钙结合蛋白(CR)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术，固相酶标板微孔包被纯化的大鼠CR特异性捕获抗体，加入标准品和待测大鼠组织样本，样本中的CR抗原与固相抗体特异性结合，洗板去除游离反应物，加入HRP标记的CR检测抗体，形成夹心免疫复合物，经洗涤纯化后显色反应，显色强度与CR含量成正比，终止后通过标准曲线完成定量检测。
基本参数‌：

产品名称：大鼠钙结合蛋白(CR)ELISA试剂盒

英文名称：CR ELISA Kit
货号：Y-E1157

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测限0.12ng/mL，可检测大鼠神经组织、骨骼组织中低丰度CR蛋白

检测范围：0.25ng/mL～16ng/mL，适配大鼠钙代谢、神经损伤模型检测

反应时间：总时长100分钟，抗体孵育70分钟，显色30分钟

保存条件：2～8℃避光冷藏，洗涤液室温密封保存，禁止高温环境放置

有效期：原装未开封有效期6个月，开封后30天内使用完毕

显色系统：经典稳定TMB显色系统，显色梯度均匀，无异常显色

检测波长：450nm检测波长，630nm背景校正

标准曲线绘制：6梯度标准品稀释，四参数拟合，R²≥0.994

特异性：特异性识别大鼠钙结合蛋白CR，与钙调素、钙网蛋白等钙结合蛋白无交叉反应

重复性：板内CV≤4.3%，板间CV≤6.3%

注意事项：样本采集后及时处理，避免蛋白降解；试剂使用前充分混匀，无沉淀残留；洗涤步骤轻柔，避免破坏包被抗体；标准品现配现用，不可储存复用。
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：

试剂盒室温回温 22min，浓缩洗涤液 1:18 稀释，大鼠肾脏组织匀浆冰上处理。

微孔板分孔添加 100μL CR 梯度标准品、肾脏上清、空白缓冲液。

一步酶结合液 100μL 每孔，密封 37℃孵育 61min。

洗涤浸泡 25s，洗 4 次，吸干微孔残留液体。

避光 TMB 显色底物 100μL，37℃孵育 12min。

终止液 50μL 混匀微孔，终止显色反应。

450nm 读取 OD 值，计算钙结合蛋白 CR 含量。
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